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碱性磷酸酶(Phosphatase, Alkaline, ALP，EC3.13.1) ，是一种含两个相同亚基的二聚体，也是一种约含12%碳水化合物(6%己糖和6%其他中性糖)的糖蛋白，每个ALP分子含4个锌离子和4个二硫键。镁离子存在情况下，ALP可达到最高酶活。AP能催化磷酸单酯水解，比如对硝基苯酚磷酸盐(pNPP) 、 磷酸苯酯、酚酞磷酸、α-甘油磷酸、β-甘油磷酸、2-磷酸甘油酸、磷酸丙糖、葡萄糖-6-磷酸、葡萄糖-1-磷酸、果糖-6-磷酸、腺苷-5-磷酸、腺苷-3-磷酸、磷酸烯醇式丙酮酸和β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸等。

碱性磷酸酶(ALP)常用来偶联抗体和其他蛋白，从而满足ELISA、WB和组织化学检测上的应用。通常用来蛋白的去磷酸化实验，比如酪蛋白和核酸等。当需要高检测灵敏度时也能用来蛋白标记。还可用在DNA或RNA的5^,-末端去磷酸以防止自连。经碱性磷酸酶的去磷酸化作用后，DNA或RNA还可被放射性标记磷酸盐标记(通过T4多核苷酸激酶)。

纯化酶产品(硫酸铵悬浮液形式)使用方法

1 当硫酸铵可能会干扰酶反应，操作如下:

1.1从冰箱内取出酶。[注: 硫酸铵悬浮液产品不可冻存! ! ]

1.2确保盖子拧紧，然后颠倒混匀数次得到乳白色悬浮液，此过程可能需要一分钟左右。 不可涡旋或超声，因如此强烈的处理可能会引|起某些酶的变性。

1.3使用宽口枪头，吸取一部分悬浮液转移到一干净的离心管内。

1.4约10,000~15,000x g离心10min.若是条件允许，低温(2-8℃) 设置下离心。.

1.5小心吸取尽可能透明的上清液，并保留到干净的离心管内。没有必要完全吸掉所有的硫酸铵溶液。

1.6用适量的反应缓冲液加入沉淀中并使其溶解。

1.7对上述得到的上清液，以及用反应缓冲液溶解的酶溶液进行蛋白含量和/或酶活力检测。

2 当硫酸铵不会干扰酶反应，操作如下:

2.1从冰箱内取出酶。[注: 硫酸铍县浮液产品不可冻存! ! ]

2.2确保盖子拧紧，然后颠倒混匀数次得到乳白色悬浮液。此过程可能需要一分钟左右。 不可涡旋或超声，因如此强烈的处理可能会引起某些酶的变性。

2.3使用宽口枪头，吸取一部分层浮液直接加入反应缓中液中即可。

[注意:对于硫酸铵悬浮液,绝大部分的酶都是以固体形式存在。很有可能仅仅可忽略量的酶以溶于硫酸铵溶液的形式存在。]

注意事项：

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一 次性手套操作。

本产品仅供科研使用，不可用于临床诊断应用或其他用途。