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明胶(Gelatin) CAS号：9000-70-8，是一种由高平均分子量的水溶性蛋白组成的非匀质混合物，存在于胶原蛋白中。通过对皮肤、肌肆、韧带和骨头等组织煮沸后提炼所得。A型明胶(Type A Gelatin)来自酸水解的组织，B型明胶(Type B Gelatin)来自石灰水解的组织。

生物学研究，明胶的应用包括: 1)包被细胞培养板以提高细胞的贴壁能力; 2) 加入PCR反应以稳定Taq DNA聚合酶活性; 3) WB、ELISA和IHC实验中用作封闭剂;4)微生物学研究用作物种分化培养基组成成分之一; 5)作为生物兼容性聚合物，明胶能用作运输载体来释放生化活性分子，或组织再生学中建立支架。

本品以牛皮为原料，提炼自石灰水解组织所得，为B型明胶。本品以冻干粉形式提供，CAS NO: 9000-70-8， 凝胶强度~225 g Bloom,达细胞培养级别。用于细胞包被基质的推荐工作浓度为0.1-0.2 mg/cm²。

使用方法：

一、 明胶溶液的制备

1.1明胶的溶解

根据实验所需的明胶浓度,称取适量明胶粉末，加入含双蒸水或PBS缓冲液的容器内，按照以下两种方法之一: 1)明胶经10 min浸泡后，用热水浴加热(温度不要超过70°C)，搅拌直至完全溶解; 2)明胶经10 min浸泡后用小火加热(温度不要超过70°C)，并不断搅拌直至完全溶解;

1.2明胶的除菌

按照以下两种方法之一:

1)高压灭菌:将配好的明胶溶液(常用浓度0.1%~2.0%之间) 装入瓶内，121℃. 15 psi,高压灭菌20min;

2)滤膜除菌:低浓度明胶溶液(如0.1%或0.2%)溶解后可用0.2μm滤膜除菌。但需多准备几个滤器，因为明胶相对比较难过滤。

1.3明胶的保存

明胶溶液稳定性比较高，置于4°C保存能长期保持稳定。[注意] :温度提高会明显降低明胶强度和粘度，导致性能降低。

二、明胶溶液的包被方法

具体的使用浓度和使用量依据细胞类型和实验目的而定。

2.1用组织培养级别的水配制2% (w/v) 的明胶溶液;

2.2 121°C，15 psi,高压灭菌20-30 min;

2.3按照5-10 μL明胶溶液/cm² (或0.1-0.2 mg/cm²)的比例包被培养皿/板/瓶表面。充分覆盖包被表面。2.4放置37°C培养箱，至少干燥2h。吸掉多余明胶溶液，用培养基或PBS缓冲液清洗一遍，晾干后即可使用。

注意事项

1)明胶冻干粉室温密封保存保持数年稳定。但在空气中加热到100C，会膨胀变软，解聚产生一种碳质并伴随吡啶碱类和氨气的产生。 < 35-40℃明胶膨胀且吸收5~ 10倍体积的水产生凝胶。明胶溶于甘油和醋酸，在热水比冷水溶解性强。几乎不溶于大多数有机溶剂比如醇类、氯仿、二硫化碳、四氯化碳、酯类、苯类、酮类和油。

2)为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

本产品仅供科研使用，不可用于临床诊断应用或其他用途。