产品名称:
中性蛋白酶/Dispase II/ neutral protease
产品描述:
中性蛋白酶(Neutral protease),商业名称dispase II,也称分散酶II。来源于Bacillus polymyxa,无支原体或其他动物病毒污染。一种非特异性金属蛋白酶,具比较温和的蛋白水解酶活性,对细胞损伤小且可维持细胞膜完整性,因此非常适合用于分离原代和继代细胞培养。研究显示Dispase II更能有效消化成纤维样细胞,相比较于上皮样细胞。Dispase II还可用于消除悬浮细胞培养过程中发生的细胞聚集。
产品特点:
该酶已被证实作用迅速有效又温和;
细胞能保持完整,细胞膜无损;
该酶非哺乳动物来源,不含支原体或动物病毒污染;
对于温度、pH的改变、以及血清成分都很稳定;
使用螯合剂或稀释就能简单灭活;
产品特性:
1.比活力:≥0.8 U/mg (37oC,使用酪蛋白作为底物,pH 7.5)
2.酶活力单位定义:One unit is the enzyme activity which liberates Folin-positive aminoacids and peptides corresponding to 1 μmol (181 μg) tyrosine in 1 minute underassay conditions (pH 7.5, +37 °C).
3.最适PH:6.0-8.5
4.激活剂(Activator): Optimal Ca2+ concentrationis 2 mM. The enzyme preparations contain enough Ca2+ for optimal activity.
5.抑制剂(Inhibitors) : EDTA, EGTA, Hg2+, other heavy metals.Dispase is not inhibited by serum.
6.建议工作浓度(Working concentration):0.6 to 2.4 U/ml
储存液和工作液的制备方法:
1)储存液制备:
用Hepes-buffered saline (50mM Hepes/KOH pH 7.4, 150 mM NaCl)溶解Dispase至10 mg/ml,可用0.22 um的无菌滤膜过滤除菌,保存在+2°~+8°,2W稳定,根据单次用量分装冻存,2个月内使用有效;不要反复冻融;
2)工作液制备:
使用时用合适的细胞培养液稀释到工作浓度即可。一般为0.6-2.4U/ml.不推荐高于2.4 U/ml的 工作浓度,。具体使用浓度请根据自身实验体系或参考文献调整。
储存和运输:
冻干粉2-8°保存,冰袋运输。