产品名称:10-310 kDa彩色预染蛋白Marker
规格:
目录号 |
产品名称 |
规格 |
X13178-250ul |
10-310 kDa彩色预染蛋白Marker |
250ul |
储存运输:
运输条件 |
冰袋运输 |
储存条件 |
-20˚C 恒温长期保存,4˚C 保存 6 个月,建议分装保存,避免反复冻融 |
产品简介
本产品由跨度从 10~310 kDa 的 10 种纯化的天然蛋白混合而成,各条带浓度约为 0.2~0.4 mg/ml。其中 75 kDa 和 310kDa 条带为红色
预染条带,25kDa 为绿色预染条带,方便判断各个条带的准确位置。本产品适合作为 SDS-PAGE 电泳时,变性蛋白样品的分子量参照,
并可实时观察蛋白样品的电泳分离状况,也可用于检测 Western blot 的转膜效率。由于共价结合的染料会影响蛋白质分子的电泳迁移率,本产品适于粗略地估计目的蛋白样品的分子量。
使用方法
1. 将本产品于室温融化后,轻柔混匀,使沉淀充分溶解;
2. 加入 3~5 μl 到 SDS-聚丙烯酰胺胶的上样孔中,与待测样品一起电泳和转膜;
3. 电泳结束后,通过考马斯亮蓝染液染色观察条带。
注意事项
1. 使用时应该将从冰箱中取出的产品恢复至室温后使用,否则可能由于低温下蛋白变性不彻底导致电泳条带出现不同程度的弥散;
2. 使用前先将产品恢复至室温后混匀,使沉淀充分溶解,否则可能导致电泳条带出现不同程度的弥散或拖带;
3. 本产品含有 SDS,蛋白已变性,不宜作为天然蛋白分子电泳时的分子量参照标准。
图列展示
附录:转膜和洗膜
A、转膜条件(冰上进行):
a. Transfer with buffer containing 20% methanol to fix proteins on membrane.
b. Wash membrane with PBS or TBS containing less than 0.1% Tween-20 at 4°C.
B、洗膜条件(4 度进行):
Membrane: Nitrocellulose membranes / PVDF
Wash Buffer:1X Tris buffered saline, 0.1% Tween-20 (TBST)(吐温 20 不能超过 0.1%)
C、Stripping Buffer: 15g Glycine, 1g SDS, 10 ml Tween20, pH2.2–Adjust volume to 1L
如果需要用到含有 DTT /b-ME 的 Stripping buffer,膜需要先以 1X Tris buffered saline(TBS) 洗三次,把 Tween-20 去
干净后,再进行 Stripping。
1X Tris buffered saline: 6.05 g Tris and 8.76 g NaCl in 800 mL of H2O.
Adjust pH to 7.5 with 1 M HCl and make volume up to 1 L with H2O
本产品仅供科研使用,不可用于临床诊断应用或其他用途。